<reponame>Codes-of-Husky/LaTeX_Materials<filename>Templates/The-LaTeX-thesis-template-of-UCAS-master/appendagesD.tex
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\chapter{附录D\quad 本研究所用溶液}\label{appen:D}
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\renewcommand{\leftmark}{附录D\quad 本研究所用溶液}
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\begin{compactitem}[\FourClowerSolid]
\item 1xAnnealing buffer for DNA oligos: 10 mM Tris, 1 mM EDTA, 50 mM NaCl (pH 8.0)\ 或\ 100 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA (pH 7.5)。注意这里是\ 1x\ 的浓度，配置时请根据需要加倍。也可以直接使用\ HiFi（TRANSGEN）中的\ 10xBuffer II。
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\item 1x\ 电泳缓冲液（1 L）：取\ 100 mL 10xTris-甘氨酸缓冲液，加入\ 10 mL 10\%SDS\ 后用去离子水定容至\ 1 L，混匀后室温保存。
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\item 1x\ BSN\ 转膜缓冲液（1 L）：取\ \SI{5.82}{\g}\ Tris、\SI{2.93}{\g}\ 甘氨酸和\ \SI{0.375}{\g}\ SDS\ 溶解在\ \SI{500}{\mL}\ 去离子水中，加入\ \SI{200}{\mL}\ 甲醇后定容至\ \SI{1}{\L}。可先配置母液，实际使用时再稀释。
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\item 1xHMDEK：20 mM HEPES，5 mM MgCl$_2$，1 mM EDTA，1 mM DTT。
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\item \SI{100}{\milli\nauticalmile}\ IPTG：取\ \SI{2.4}{\g}\footnote{使用\ GraphPad\ 的\ Molarity Calculator (http://www.graphpad.com/quickcalcs/Molarityform.cfm)\ 计算所需的质量。}\ IPTG\ 溶解在\ \SI{100}{\mL}\ 水中，使用\ \SI{0.22}{\um}\ 的滤膜过滤除菌，分装后\ \SI{-20}{\degreeCelsius}\ 保存备用。
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\item 10\% SDS（W/V）(50 mL)：取\ 5 g SDS，加入\ 30 mL\ 去离子水后在微波炉中用小火加热溶解，定容至\ 50 mL\ 后混匀，室温保存。
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\item 1xTAE：取\ 20 mL\ 的\ 50xTAE\ 缓冲液，加去离子水混匀后定容至\ 1 L。
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\item 1xTAPS（0.4\% PEG6000）:取\ 0.4 g PEG6000\ 溶解在\ 90 mL\ TAP中，用\ 0.22 $\upmu$m\ 的滤器过滤到无菌的蓝盖瓶中，加入\ 10 mL\ 的\ 10xTAPS\ 后混匀室温保存。
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\item 1xTAPS：取\ 10 mL\ 的\ 10xTAPS\ 加入到\ 90 mL\ TAP中，混匀后室温保存。
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\item 10xTAPS：取\ 10.93 g D-Sorbitol\ 溶解在\ 100 mL\ TAP\ 中，用\ 0.22 $\upmu$m\ 的滤器过滤到无菌的蓝盖瓶中，室温保存。
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\item 10\%\ 过硫酸铵溶液（W/V）(10 mL)：取\ 1 g\ 过硫酸铵用少量去离子溶解后定容到\ 10 mL，用\ 1.5 mL\ 离心管\ 500 $\upmu$L\ 分装后于\ \SI{4}{\degreeCelsius}\ 保存。
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\item 10x\ 丽春红染色液：取\ 2 g\ 丽春红\ S、30 g\ 三氯乙酸和\ 30 g\ 磺基水杨酸，加少量去离子水溶解后定容至\ 100 mL，混匀后室温保存。使用前用水稀释十倍。
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\item 10xTBS：取\ 87.6 g NaCl、30 g Tris\ 和\ 2 g KCl，加\ 950 mL\ 去离子水溶解后用浓盐酸调\ pH\ 值为\ 8.0，去离子水定容至\ 1 L，混匀后室温保存。
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\item 10xTris-甘氨酸缓冲液（2 L）：取\ Tris 60.58 g，甘氨酸\ 288.4 g，用少量去离子水溶解后定容至\ 2 L，混匀后室温保存。
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\item 2xLaemmli\ 上样缓冲液：取\ 4 mL\ 10\%SDS（W/V），2 mL\ 甘油，1.2 mL 1 M Tris-Cl (pH 6.8)\ 混匀，加入溴酚蓝粉末至其终浓度为\ 0.02\%（W/V），最后用去离子水定容至\ 10 mL。混匀后室温保存。
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\item 20\%\ 淀粉溶液：取\ 4 g\ 淀粉加入到\ 50 mL\ 离心管中，加入\ 20 mL\ 无水乙醇，涡旋混匀后\ 1000 g\ 室温离心一分钟弃上清。用\ 20 mL\ 无菌水洗涤两次，最后用\ 70\%\ 酒精定容到\ 20 mL。
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\item 20\%\ 吐温\ 20：取\ 20 mL\ 吐温\ 20\ 加入\ 80 mL\ 去离子水，混匀后室温保存。
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\item 20 mg/mL X-gal：使用\ DMF\footnote{Dimethylformamide，二甲基甲酰胺}\ 配制\ X-gal，分装后\ \SI{-20}{\degreeCelsius}\ 保存备用。
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\item 30\%\ 凝胶贮液（W/V）（Acr$\cdot$Bis, 291）：Bio-Rad\ 原液。该试剂有一定毒性，使用时请注意防护。
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\item 5x样品缓冲液（50 mL）：3 mL 1 mol/L Tris-HCl（pH 6.8），25 mL 50\% 甘油，10 mL10\% SDS，2.5 mL $\upbeta$-巯基乙醇，5 mL 1\%\ 溴酚蓝，4.5 mL\ 去离子水。混匀后\ \SI{4}{\degreeCelsius}\ 保存。
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\item 50xTAE：称取\ Tris base 242 g、Na$_2$EDTA$\cdot$2H$_2$O 37.2 g，加入\ 800 mL\ 的去离子水充分搅拌溶解。加入\ 57.1 mL\ 的冰醋酸并充分混匀。加去离子水定容至\ 1 L，室温保存备用。
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\item 氨基黑溶液：取\ 0.5 g\ 氨基黑\ 10B，加入\ 100 mL\ 洗涤缓冲液，混匀后过滤两次，最后用洗涤缓冲液定容到\ 100 mL。
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\item CaCl$_2$$\cdot$甘油溶液：配置\ 0.2 M\ 的\ CaCl$_2$\ 溶液，过滤除菌。将其与\ 20\%\ 的甘油等体积混合。
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\item 分离胶缓冲液（pH 8.8）：取\ Tris 181.65 g，加入少量去离子水溶解后再加水至总体积约\ 950 mL，用浓盐酸调\ pH\ 值为\ 8.8\ 后定容至\ 1 L，室温保存。
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\item GST pull-down\ 裂解液：50 mM Phosphate buffer pH 7.5，150 mM NaCl，10\% glycerol
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\item 考马斯亮蓝\ G250\ 染色液（1 L）：取\ 100 mg\ 考马斯亮蓝\ G250\ 溶解在少量去离子水中，缓慢加入\ 250 mL\ 异丙醇并搅拌，加入\ 100 mL\ 冰醋酸搅拌混匀后用去离子水定容至\ 1 L。混匀后用普通滤纸过滤室温保存。
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\item Kodak RP X-OMAT\ 显影液：取\ 500 mL\ A\ 液，各加入\ 20 mL\ B\ 液和\ C\ 液，用去离子水定容至\ 1.5 L，混匀后用棕色试剂瓶分装\ \SI{4}{\degreeCelsius}\ 保存。
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\item Millipore\ 化学发光\ HRP\ 底物：使用前取等体积的两种试剂混匀。
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\item MgCl$_2$$\cdot$CaCl$_2$\ 溶液\ (\SI{500}{\mL})：取\ MgCl$_2$$\cdot$6H$_2$O 8.13 g，加入少量去离子水溶解后再加入\ 1.11 g CaCl$_2$，用去离子水定容至\SI{500}{\mL}。MgCl$_2$\ 和\ CaCl$_2$\ 的终浓度分别为\ 80 mM\ 和\ 20 mM。
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\item 浓缩胶缓冲液（pH 6.8）：取\ Tris 181.65 g，加入少量去离子水溶解后再加水至总体积约\ 950 mL，用浓盐酸调\ pH\ 值为\ 6.8\ 后定容至\ 1 L，室温保存。
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\item RNaseA (\SI{1}{\ug}/\uL)：取\ 35 mg RNaseA\ 粉末加入至含\ 3.2 mL\ 的\ 0.01 M\ 醋酸钠（pH 5.3）的\ 5 mL\ 离心管内。沸水煮十五分钟，室温静置冷却。加入\ 0.1\ 倍体积即\ 0.32 mL\ 的\ Tris-Cl（1 M, pH 8.0）调\ pH\ 至\ 7.4。\SI{-20}{\degreeCelsius}\ 保存备用。
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\item SBA\ 溶液：取\ 1 M DTT\ 和\ 1 M\ 碳酸钠各\ \SI{100}{\uL}\ 至洁净的\ 2 mL\ 离心管内，加入\
\SI{800}{\uL}\ 双蒸水和\
\SI{17}{\uL}\ 的\ 100x\ 蛋白酶抑制剂，混匀后立即使用。
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\item SBB\ 溶液：取\ 5 g SDS\ 粉末，30 g\ 蔗糖，加水溶解并定容至\ 100 mL。如\ SDS\ 不能立即溶解可室温静置过夜再定容。
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\item 山羊血清封闭液：5\% BSA，1\% cold water fish gelatin，10\%\ 山羊血清
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\item TBST\ 溶液：取\ 100 mL 10xTBS，加入\ 2.5 mL 20\%\ 吐温\ 20，用去离子水定容至\ 1 L，混匀后室温保存。
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\item TEMED（四乙基乙二胺）：原液。该试剂易燃，有腐蚀性和强神经毒性，操作时请穿实验服并佩戴一次性口罩和手套在通风橱中进行。使用结束后请及时盖紧瓶盖并放回\ \SI{4}{\degreeCelsius}\ 冰箱。
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\item 脱色液（1 L）：冰醋酸\ 100 mL，乙醇\ 50 mL，去离子水定容至\ 1 L，混匀后室温保存。
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\item 洗涤缓冲液：取甲醇\ 450 mL，加入\ 50 mL\ 冰醋酸混匀后室温保存。
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\item 医用\ X\ 光胶片定影液：按照产品的操作说明依次将两种粉末溶解在去离子水中并定容至\ 3.5 L，混匀后用棕色试剂瓶分装\ \SI{4}{\degreeCelsius}\ 保存。
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\item 转膜缓冲液：取\ 100 mL 10xTris-甘氨酸缓冲液，加入\ 200 mL\ 无水乙醇，用去离子水定容至\ 1 L，混匀后室温保存。
%结束列表环境
\end{compactitem}